抗体的标记——异硫氰酸荧光素（FITC）

1. 将待标记的抗体/蛋白（浓度≧1mg/ml）对标记反应液 (90mM NaHCO3，10mM Na2CO3，126mM NaCl,pH9.0) 于4℃透析三次。

2. 将FITC(Frdbio)溶于DMSO中，浓度为20mg/ml。每次交联使用的FITC均应新鲜配制，避光。

3. （抗体/蛋白质：FITC）=1mg:150μg的比例将FITC缓慢加入于抗体溶液中，边加边轻轻晃动使其与抗体混合均匀，避光4℃反应8h。

4. 加入5M的NH4Cl至终浓度50mM，4℃终止反应2h。

5. 将标记产物在PBS中透析4次以上，至透析液清亮。

6. 交联物的鉴定

蛋白浓度(mg/ml)=[A280–0.31×A495]/1.4

抗体/蛋白质：FITC比例=3.1×A495/（A280–0.31×A495），该值应介于2.5～6.5之间。

7. FITC标记的蛋白应置于pH7.4的磷酸盐缓冲液中，加入0.1% NaN3、1% BSA，30%甘油，短期保存于4℃避光，长期应该-20℃避光保存。